PCR實(shí)驗(yàn)室風(fēng)淋室與凈化設(shè)備要求
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實(shí)驗(yàn)室凈化設(shè)備，比如臭氧、紫外線(xiàn)燈、風(fēng)淋室（包括貨淋室）、傳遞窗、超凈工作臺(tái)、FFU、高效送風(fēng)口、互聯(lián)鎖等凈化輔助設(shè)備?？諝膺^(guò)濾系統(tǒng)，有初效過(guò)濾器、中效過(guò)濾器、高效過(guò)濾器等。
PCR實(shí)驗(yàn)室有哪些凈化要求？
分類(lèi)：實(shí)驗(yàn)室家具
一、PCR實(shí)驗(yàn)（experiment)室并沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能（maybe)性，宜采用全送全排的氣流組織形式。實(shí)驗(yàn)室凈化由于潔凈實(shí)驗(yàn)室-生物安全實(shí)驗(yàn)室內(nèi)操作對(duì)象是危險(xiǎn)性的微生物，對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有危害，必須通過(guò)采用合理的空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)，保持潔凈實(shí)驗(yàn)室-生物安全實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)負(fù)壓環(huán)境無(wú)論何時(shí)都不被破壞，以保證實(shí)驗(yàn)室內(nèi)危險(xiǎn)性微生物不能向外部環(huán)境中擴(kuò)散。同時(shí)，要嚴(yán)格控制（control)送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
2.1試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)
二、實(shí)驗(yàn)（experiment)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)，不得經(jīng)過(guò)其他區(qū)域。試劑原料(raw material)必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。 對(duì)與氣流壓力的控制（control)，本區(qū)并沒(méi)有嚴(yán)格的要求。
標(biāo)本制備區(qū)
試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)
標(biāo)本制備區(qū)
擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)
緩沖區(qū)
傳遞窗
擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)
三、本區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。
四、該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測(cè)定。凈化實(shí)驗(yàn)室必須控制實(shí)驗(yàn)室的潔凈度，對(duì)新風(fēng)進(jìn)行過(guò)濾，使實(shí)驗(yàn)室達(dá)到一定的凈化要求。其中排風(fēng)系統(tǒng)是重點(diǎn)，對(duì)于保證實(shí)驗(yàn)室相對(duì)負(fù)壓環(huán)境和有效過(guò)濾室內(nèi)污染排風(fēng)起著重要的作用。
PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建設(shè)中容易出現(xiàn)的問(wèn)題(實(shí)驗(yàn)室家具)：
1、PCR實(shí)驗(yàn)室的空氣流向必須嚴(yán)格按照試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)空氣壓力逐漸遞減方式進(jìn)行，防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域。需要嚴(yán)格的通風(fēng)設(shè)計(jì)，若通風(fēng)設(shè)計(jì)不合理，會(huì)使風(fēng)速流向混亂，甚至危害人們健康。
2、人流路徑與物流路徑設(shè)計(jì)不合理：
進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室區(qū)域工作人員應(yīng)該按照以下路徑：公共清潔區(qū)——更衣間（更換潔凈服）——緩沖間——風(fēng)淋室——污染實(shí)驗(yàn)區(qū)。
工作人員退出實(shí)驗(yàn)室的路徑為：污染試驗(yàn)區(qū)——緩沖間——風(fēng)淋室（有條件的可設(shè)置）——更衣間——公共清潔區(qū)
PCR實(shí)驗(yàn)室污染方式及處理（實(shí)驗(yàn)室家具）
分類(lèi)： 實(shí)驗(yàn)室家具
有實(shí)驗(yàn)室的地方，就不可避免的會(huì)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室污染。實(shí)驗(yàn)室的污染，不僅會(huì)影響實(shí)驗(yàn)與科研的質(zhì)量和效果,還對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員的身體健康有損害，PCR實(shí)驗(yàn)室的污染原因及解決方法。
PCR實(shí)驗(yàn)室污染
標(biāo)本間交叉污染：標(biāo)本污染主要有收集標(biāo)本的容器被污染，或標(biāo)本放置時(shí)，由于密封不嚴(yán)溢于容器外，或容器外粘有標(biāo)本而造成相互間交叉污染；標(biāo)本核酸模板在提取過(guò)程中，由于吸樣槍污染導(dǎo)致標(biāo)本間污染;有些微生物標(biāo)本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴(kuò)散，導(dǎo)致彼此間的污染。
PCR試劑的污染：主要是由于在PCR試劑配制過(guò)程中，由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。
PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染：這是PCR反應(yīng)中最主要最常見(jiàn)的污染問(wèn)題。因?yàn)镻CR產(chǎn)物拷貝量大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測(cè)數(shù)個(gè)拷貝的極限，所以極微量的PCR產(chǎn)物污染，就可造成假陽(yáng)就可形成假陽(yáng)性。
還有一種容易忽視，最可能造成PCR產(chǎn)物污染的形式是氣溶膠污染；在空氣與液體面摩擦?xí)r就可形成氣溶膠，在操作時(shí)比較劇烈地?fù)u動(dòng)反應(yīng)管，開(kāi)蓋時(shí)、吸樣時(shí)及污染進(jìn)樣槍的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠而污染。
實(shí)驗(yàn)室中克隆質(zhì)粒的污染：在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室及某些用克隆質(zhì)粒做陽(yáng)性對(duì)照的檢驗(yàn)室，這個(gè)問(wèn)題也比較常見(jiàn)，因?yàn)榭寺≠|(zhì)粒在單位容積內(nèi)含量相當(dāng)高，另外在純化過(guò)程中需用較多的用具及試劑，而且在活細(xì)胞內(nèi)的質(zhì)粒，由于活細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖的簡(jiǎn)便性及具有很強(qiáng)的生命力，其污染可能性也很大。
PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)方案
分類(lèi)： 實(shí)驗(yàn)室裝修
1、主體結(jié)構(gòu)：
主體為彩鋼板、鋁（Al)合金(熔點(diǎn)660)型材。室內(nèi)所有陰角、陽(yáng)角均采用鋁合金
50內(nèi)圓角鋁（Al)，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問(wèn)題。結(jié)構(gòu)牢固，線(xiàn)條簡(jiǎn)明，美觀大方，密封性好。
2、標(biāo)準(zhǔn)的四區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)：
將PCR過(guò)程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物分析(Analyse)四個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)（experiment)區(qū)。凈化實(shí)驗(yàn)室控制系統(tǒng)是整個(gè)潔凈實(shí)驗(yàn)室安全運(yùn)行的神經(jīng)中樞,由于潔凈實(shí)驗(yàn)室-生物安全實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)對(duì)象是危險(xiǎn)性的微生物，出于嚴(yán)格控制污染的原則，它要求以最少的維護(hù)人員，運(yùn)用最優(yōu)化的管理維護(hù)手段，來(lái)實(shí)時(shí)監(jiān)控每一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中設(shè)備所處的物理環(huán)境，保證實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行過(guò)程中始終處于相對(duì)負(fù)壓環(huán)境，防止危險(xiǎn)性微生物外泄。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)，同時(shí)各區(qū)通過(guò)氣壓調(diào)節(jié)，使整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低（reduce)擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。
可打開(kāi)緩沖區(qū)，緩沖區(qū)和 PCR 擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣，在實(shí)驗(yàn)（experiment)區(qū)的外墻上和各扇門(mén)上都安裝有風(fēng)量(定義:單位時(shí)間內(nèi)空氣的流通量)可調(diào)的回風(fēng)口，空氣通過(guò)回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。
3、消毒：
在三個(gè)實(shí)驗(yàn)（experiment)區(qū)和三個(gè)緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。潔凈實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌試驗(yàn)室、生物安全實(shí)驗(yàn)室必須保證人身安全、環(huán)境安全、廢棄物安全和樣本安全，能長(zhǎng)期而安全地運(yùn)行，同時(shí)還為需要實(shí)驗(yàn)室工作人員提供一個(gè)舒適、而良好的工作環(huán)境。
在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū)還設(shè)置移動(dòng)紫外線(xiàn)（Ultraviolet rays)燈，對(duì)實(shí)驗(yàn)（experiment)桌進(jìn)行局部（part)消毒。
4、不銹鋼(不銹耐酸鋼)傳遞（transmission)窗：
試劑和標(biāo)本通過(guò)機(jī)械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標(biāo)本在傳遞過(guò)程中不受污染（人物分流）。
5、地面
地面建議使用聚氯乙烯(Polyvinyl chloride)卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進(jìn)行清掃，耐腐蝕(釋義:指腐爛、消失、侵蝕等)。
